スライド法で部分凝集を正確に判定する方法と原因・対処の全知識
部分凝集が出たとき、その結果だけをそのまま報告するのはタブーです。
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スライド法の部分凝集とは何か？基本の見え方と表記ルール
輸血検査では、血液型を判定するために試験管法・カラム凝集法・マイクロプレート法・スライド法などの検査手技が使われます。このうち、スライド法は「簡便」かつ「部分凝集の判定に有効」という特徴を持ちます。
部分凝集（Partial Agglutination）とは、凝集している赤血球と凝集していない赤血球が混在している状態のことです。輸血検査の表記では mf（mixed field） または DP（double cell population） と表現されます。
通常の凝集反応は、0・w+・1+・2+・3+・4+の6段階と溶血（H）で分類されます。これらとは別に、mfは「強さを記入する必要はなく、単にmfとだけ記載する」のがルールです。たとえば「4+mf」のような表記は誤りで、正しくは「mf」のみとなります。
スライド法での部分凝集の見え方には特徴があります。数個から十数個のほぼ同サイズの凝集塊が背景に濁りとして観察されます。試験管法の場合は凝集部分と非凝集部分の境界がやや曖昧に見えることがありますが、スライド法では凝集部分と非凝集部分が比較的鮮明に分かれる傾向があります。
これは使えそうですね。
一方、マイクロプレート法を原理とした自動機器では「部分凝集という概念がない」ため、部分凝集を捉えることができず、弱陽性として判定されてしまうことがあります。和歌山県臨床検査技師会の精度管理調査では、部分凝集を誤判定した施設のすべてが部分凝集を見逃していたとの報告もあります。スライド法は、こうした自動機器では検出困難な部分凝集を視覚的に確認するための補助手段として重要な位置を占めています。
部分凝集が重要な理由は明確です。部分凝集はABO血液型検査における「異常反応」であり、発見された場合はオモテ検査を保留とし、血液型の総合判定も「判定保留」としなければなりません。その結果だけをそのまま報告するのはタブーとされています。
参考資料：部分凝集の概念と分類について（日本医学臨床検査研究所）
https://www.jcl.co.jp/img/news/pdf/LINE202205.pdf
スライド法で部分凝集が起こる6つの主な原因
部分凝集が観察されたとき、最初に考えるべきは「なぜ混在しているのか」です。原因はひとつではなく、大きく分けて以下のようなカテゴリーが存在します。
まず、新生児・生後4か月以下の乳児では、ABO抗原がまだ未熟なために部分凝集を示すことがあります。この場合は病的な意味はなく、成長とともに抗原が完成します。
次に多いのが ABO亜型（A3・B3・Amos・Bmosなど） です。ABO亜型とは、A抗原やB抗原の発現量が通常と異なる表現型の総称で、中でもA3型やB3型は部分凝集を呈する代表例として知られています。通常のA型と比べてA抗原量が少なく、抗A試薬との反応で一部の赤血球しか凝集しないために部分凝集が生じます。日本人では100万人に1人程度という報告もある非常にまれな血液型です。
3つ目は 血液型キメラ・モザイク です。キメラとは、遺伝的に異なる2種類の赤血球集団が同一人物の体内に共存している状態で、双生児の胎盤血管吻合による造血幹細胞の移行が原因のひとつとして知られています。血液型キメラの場合、スライド法では「一塊の凝集＋背景の濁り」という特徴的なパターンが観察されます。つまり亜型が原因の場合とは反応パターンが異なります。
4つ目は 白血病などによる後天的な抗原減弱 です。白血病やMDS（骨髄異形成症候群）などの血液疾患に罹患すると、赤血球表面のABH抗原の発現が低下し、部分凝集に似た反応を呈することがあります。「抗原減弱」と「部分凝集（亜型）」は外見上似ていますが、典型的な抗原減弱では中小さまざまな大きさの凝集塊が非凝集赤血球と混在し、一方の典型的な部分凝集では比較的大きな凝集塊が非凝集赤血球と混在するとされます。ただし両者を厳密に区別するのは難しい場面もあります。
5つ目は 異型輸血後 です。O型の輸血を受けたA型・B型・AB型の患者では、輸血されたO型の赤血球が体内で混在します。たとえば大量出血時にO型赤血球を緊急使用したケースでは、その後の血液型検査でオモテ検査に部分凝集が現れます。この場合はウラ検査が通常の反応を示すことが多く、それが重要な鑑別のヒントになります。
6つ目は 血液型不適合造血幹細胞移植後 です。HLA型を優先した移植ではABO型不適合のケースがあり、ドナーとレシピエントで血液型が異なる場合、移植後しばらくは2種類の赤血球集団が体内に共存して部分凝集が観察されることがあります。
原因が複数あるということですね。
| 原因カテゴリー | 主な特徴 | 追加調査の目安 |
|—|—|—|
| 新生児・乳児（4か月以下） | ABO抗原の未熟 | 患者年齢を確認 |
| ABO亜型（A3・B3など） | 凝集開始時間の遅延あり | 被凝集価・型転移酵素測定 |
| 血液型キメラ | 一塊の凝集＋背景の濁り | 家系調査・FCM解析 |
| 抗原減弱（白血病など） | 血液疾患の既往 | 疾患名・治療歴の確認 |
| 異型輸血後（O型血など） | 輸血歴あり | 輸血記録の照合 |
| 造血幹細胞移植後 | 移植歴あり | ドナー血液型の確認 |
スライド法での部分凝集判定における2つの重要観察ポイント
部分凝集が疑われるとき、スライド法を実施する目的は主にひとつです。「凝集開始時間の遅延」と「背景の濁り」を詳しく観察し、ABO亜型・キメラ・抗原減弱などの原因を絞り込む手がかりを得ることです。
日本輸血・細胞治療学会の「輸血のための検査マニュアルVer.1.4」に付随するABO亜型鑑別フローチャートでも、スライド法での凝集開始時間の遅延の有無が、B3型亜型かどうかを判断するフローの分岐点として明示されています。
ポイント①：凝集開始時間の観察
スライド法を実施したら、試薬滴下直後から2分間、凝集の形成過程を継続して観察します。単に2分後の最終状態だけを見るのではなく、スタートから2分経過するまでの凝集形成の過程を観察することが重要です。
亜型（例：B3型）が原因の場合、抗原量が少ないために凝集形成が遅く、10秒〜30秒では凝集が観察されず、1分以上経過してから小さな凝集塊が現れることがあります。これを「凝集開始時間の遅延」と呼びます。一方、血液型キメラの場合は表現型同士の混在であるため、凝集開始時間は亜型に比べて早い（10秒程度から開始する）のが特徴です。
ポイント②：背景の濁りの観察
凝集しない赤血球が混在していると、凝集塊が形成される一方で背景が赤く濁ります。完全に凝集した場合（4+）は背景が透明になりますが、部分凝集では背景が赤く濁ります。この「背景の濁り＝凝集しない赤血球集団の存在」がポイントです。
対照検体を必ず一緒に検査するのが重要です。
たとえばA亜型やA抗原の減少が想定されるケースでは正常のA型を対照に、本質的にはAB型でA抗原またはB抗原が弱い場合は正常のAB型を対照にします。対照との比較によって、凝集開始時間の差や背景の濁りの違いが明確になります。
実際のケース例として、あるB型疑いの検体では、スライド法で凝集が10秒程度から始まり次第に凝集塊が大きくなったが背景に濁りが観察されました。凝集開始時間に顕著な遅延がなかったためABO亜型の可能性は否定的となり、被検者は20歳代で血液疾患も輸血歴もなかったことから血液型キメラの可能性が高いと判断され、次の精査（FCM解析）へ進んだ事例が報告されています。
参考資料：スライド法による凝集開始時間の観察とABO亜型鑑別フローチャート（日本輸血・細胞治療学会）
https://yuketsu.jstmct.or.jp/wp-content/uploads/2024/04/90309162ebf35c800d577b349d3d1c2d.pdf
部分凝集を発見したあとの再検査と精査の進め方
部分凝集が観察された場合の対応手順は、まず「再現性の確認」から始まります。以下の流れで進めることが推奨されています。
Step 1：試薬・手技・コンタミの確認
最初に確認すべきは「検査自体のエラーではないか」です。具体的には次の項目を確認します。
– 試薬の有効期限が切れていないか
– 患者血球濃度（赤血球浮遊液濃度）が適切か（2〜5%が原則）
– 分注手技に問題はなかったか（スポイトの汚染・コンタミネーションの有無）
– 遠心条件は正しかったか（900〜1000G、約15秒）
技術的エラーが排除できたら、必ず再採血し試験管法にて再検査を実施します。異なる検査者による再判定も推奨されます。
再現性が確認できれば次のステップへ進みます。
Step 2：患者情報の収集
再検査と同時進行で、患者の情報を収集することが極めて重要です。確認すべき情報は以下のとおりです。
– 患者の年齢（新生児・乳児ではないか）
– 疾患名・治療歴（白血病・MDSなど血液疾患の有無）
– 輸血歴（他院を含む輸血履歴、緊急O型血の使用有無）
– 移植歴（造血幹細胞移植を受けているか）
– 双生児の有無（血液型キメラの可能性を念頭に）
患者情報がなければ精査が迷子になります。
Step 3：追加検査の実施
患者情報と再検査の結果をもとに、日本輸血・細胞治療学会が公開するABO亜型鑑別フローチャートを参考に追加検査を選択します。主な追加検査は次のとおりです。
| 追加検査 | 目的 |
|—|—|
| 抗A1レクチン・抗Hレクチンとの反応 | A亜型の分類（A2以下か否かの判定） |
| 被凝集価の測定 | 亜型のタイプ分類 |
| 血漿中の糖転移酵素活性測定 | ABO亜型か否かの確認 |
| 唾液中の型物質の確認（中和抑制試験） | 分泌型か否かの確認 |
| フローサイトメトリー（FCM）解析 | 血液型キメラの確認（二峰性パターン） |
| 吸着解離試験 | 微量の抗原の検出（Bmなどの超弱型） |
| 家系調査・双生児の確認 | 先天性キメラの確認 |
Step 4：緊急輸血が必要な場合の対応
精査が完了するまでの間に輸血が必要なケースでは、ABO血液型が確定できない患者には「赤血球製剤はO型、血漿製剤はAB型」を選択するのが原則です。これにより、血液型不一致による溶血性輸血反応のリスクを最小化できます。
参考資料：輸血検査疑義解釈Q&A（日本輸血・細胞治療学会 輸血検査技術講習委員会）
https://yuketsu.jstmct.or.jp/wp-content/uploads/2024/09/1014f85bcaac140f478efc40603f6aa2.pdf
キメラと亜型の見分け方：スライド法で反応パターンが異なる理由
部分凝集を引き起こす原因として最も鑑別に悩むのが「血液型キメラ」と「ABO亜型」の区別です。この2つは、スライド法での反応パターンに明確な違いがあります。
ABO亜型（A3・B3型）の場合
亜型では赤血球1個1個の抗原量が少ないため、抗体試薬との反応が弱く、凝集形成に時間がかかります。スライド法では「凝集開始時間の遅延」が見られます。たとえば、通常のA型では数秒以内に凝集が始まりますが、A3型やB3型では30秒以上遅れて微小な凝集が現れ、2分後でも凝集塊が小さく崩れやすいのが特徴です。厚生省（現・厚生労働省）の基準では、A2型赤血球では30秒、A2B型赤血球では45秒が凝集開始時間の目安とされています。試験管法の振り出しでも「弱い凝集のため崩れながら剥がれる」のがA亜型の典型像です。
亜型の確認が条件です。
血液型キメラの場合
血液型キメラでは、遺伝子型が異なる2種類の赤血球（例：A型赤血球とO型赤血球）が混在しています。A型赤血球はA抗原を十分に持っているため、抗A試薬と出会うと素早く大きな凝集を作ります。一方O型赤血球はA抗原を持たないので凝集しません。その結果、スライド法では「素早く形成される一塊の大きな凝集塊＋赤く濁った背景」というパターンが観察されます。A/Oキメラでは試験管法でも「非凝集部分（O型）が試験管底に残り、凝集部分（A型）は一塊として試験管から剥がれる」のが特徴的です。
つまり、凝集開始が速ければキメラが原因です。
FCM（フローサイトメトリー）解析ではキメラの確認にとりわけ有用で、A型とO型の2つの赤血球集団が「陰性と陽性の二峰性のヒストグラムパターン」として観察されます。対してABO亜型の場合は遺伝子検査で解決できることが多く、両者の精査アプローチは根本的に異なります。血液型キメラは血清学的検査が唯一の解決方法であり、遺伝子検査では解決しない点が重要なポイントです。
また鑑別をさらに難しくするのが、「B抗原が減弱した例においても、B/Oキメラに類似したFCMパターンが観察される場合がある」という事実です。被検者の情報（双生児の有無、疾患などの情報）を可能な限り入手することが不可欠なのはそのためです。
| 比較項目 | ABO亜型（A3・B3型） | 血液型キメラ |
|—|—|—|
| 凝集開始時間 | 遅延あり（30秒以上） | 遅延なし（10秒前後） |
| 凝集塊の特徴 | 崩れやすい小〜中型 | 一塊の大きな凝集 |
| 背景の濁り | あり | あり |
| 試験管底の残留 | 弱い凝集が崩れる | 非凝集部分（異型赤血球）が残る |
| FCM解析 | 単峰性または弱い二峰性 | 明確な二峰性パターン |
| 遺伝子検査 | 有効 | 解決不可 |
参考資料：スライド法によるABO亜型とキメラの反応パターンの違い（Blood Group Tech）
https://www.bloodgroup-tech.work/entry/2021/02/01/051733
スライド法の部分凝集判定で陥りがちな見落としと注意点【独自視点】
スライド法で部分凝集を判定する際、経験が浅いうちにやってしまいがちな落とし穴が存在します。現場でよく聞かれる問題点を整理します。
落とし穴①：2分後だけを見て判定する
スライド法で最も多い見落としのひとつです。2分後の静止画だけを確認しても、凝集開始時間の遅延（亜型の特徴）には気づけません。タイマーをスタートさせ、10秒ごとに凝集形成の様子を目視で追うことが求められます。「10秒で凝集が始まったか、30秒経っても始まらないか」この差が、キメラと亜型の鑑別において決定的な情報になります。
落とし穴②：対照検体を用意せずに判定する
部分凝集かどうかの判断は、「正常な場合に比べてどれだけ違うか」が鍵です。単独で検体を観察しても判断が難しいことがあります。A抗原の減少が疑われるなら正常のA型を、AB型のB抗原が弱い疑いがあるなら正常のAB型を対照として同時に検査することで、比較が格段に容易になります。対照なしの判定は信頼性が低いということですね。
落とし穴③：マイクロプレート法の全自動機器を過信する
マイクロプレート法を原理とした自動機器は業務効率化に優れますが、部分凝集の概念がなく、部分凝集を弱陽性として判定します。2025年の奈良県臨床検査技師会の報告では、全自動輸血検査装置がO型と判定した検体が試験管法ではB型と判定されたという事例もあります。自動機器の結果だけで完結させず、異常を示すメッセージ（「？」「不可」など）が出た場合は必ずスライド法や試験管法での確認を追加する姿勢が重要です。
落とし穴④：AB型のB抗原の弱い反応を「部分凝集」として過剰精査する
意外に思われるかもしれませんが、AB型の患者ではB抗原量がもともとB型の人に比べて少ないため、抗B試薬との反応でわずかな背景の濁りを生じることがあります。これは正常範疇の変動であることが多く、オモテ・ウラが一致しているなら特に深掘りする必要はないとされています。すべての弱い濁りを「部分凝集」として精査対象とすると、臨床的に問題のない検体に対して不要な精査時間と工数を費やしてしまいます。「輸血検査を一定期間経験した担当者であれば誰もがおかしいと気がつく程度（抗Aまたは抗Bと反応しない集団が概ね15〜20%以上ある場合）」が部分凝集精査の目安とされている点は、参考にすべき基準です。
厳しいところですね。
落とし穴⑤：部分凝集の結果をそのまま報告する
これは最も避けなければならない誤りです。日本赤十字社・中四国血液センターの資料でも「部分凝集は異常反応であるためオモテ検査は保留となり、ABO血液型の総合判定は判定保留となりますが、この時の結果をもって報告するのはタブーです」と明記されています。部分凝集が再現性をもって観察された場合は、上記の精査ステップを経て原因を特定してから報告することが安全な輸血実施の大前提です。
部分凝集の判定スキル向上には、日本輸血・細胞治療学会や各都道府県の臨床検査技師会が開催する輸血テクニカルセミナーへの参加が有効です。疑似検体を使った「目合わせ」による部分凝集の実際の見え方を体験することで、施設内での判定基準の統一にもつながります。また、「フローチャートと動画でみる輸血検査」（医書.jp）のような実技動画付き参考書を手元に置くことも、日常業務のスキルアップに役立ちます。
参考資料：輸血テクニカルセミナー2015 実技解説テキスト（日本臨床検査技師会）
https://www.jamt.or.jp/data/asset/docs/2015_tech_seminor_text1.pdf.pdf
詳解 不動産鑑定評価の教科書―実務の視点でよくわかる